pcr试剂有毒吗（pcr试剂）

大家好,小陆来为大家解答以上的问题。pcr试剂有毒吗，pcr试剂这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！

1、pcr扩增所用的试剂：pcr扩增步骤：1．细菌染色体DNA的提取（见上一组） 2．RAPD反应体系的配置（上图）3·反应程序：将RAPD反应试剂加入EP管中 轻混后用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上，防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发，盖好盖子。

2、打开PCR反应仪输入以下反应数据 ·  94 摄氏度预变性5min ·  94摄氏度变性40s ·  40摄氏度退火40s ·  72摄氏度延伸1min 将EP管放入仪器开始扩增，循环35次；72摄氏度延伸10min注意事项：PCR反应体系中DNA样品及各种试剂的用量都极少，必须严格注意吸样量的准确性及全部放入反应体系中。

3、 2、为避免污染凡是用在PCR反应中的Tip尖、离心管、蒸馏水都要灭菌；吸每种试剂时都要换新的灭菌Tip尖。

4、 3、加试剂时先加消毒三蒸水，最后加DNA模板和Taq DNA聚合酶。

5、 4、置PCR仪进行PCR反应前，PCR管要盖紧，否则使液体蒸发影响PCR反应。

6、 5、引物条件首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应（即错配）。

7、对于一般的PCR实验（非特殊情况），主要试剂是：引物（上、下游引物），Taq酶、dNTP、Mg2+、缓冲液buffer。

8、当然，还需要准备你待扩增用的DNA。

9、反应体系：2xBIOGHC Elitefast SYBR Mastermix 10μl上下游引物 (10μM) 各0.4μl模板DNA 10ng-1μg50 × ROX 0.4μlddH2O 加至20µl介绍 BIOGHC Elitefast SYBR Kit采用本公司生产的经化学修饰的热启动聚合酶，有效避免了非特异扩增和引物二聚体的形成，具有高度的特异性。

10、反应缓冲液经多次优化，与热启动聚合酶具有最为乐观的搭配，使聚合酶的活性能够得到最大程度的发挥。

11、反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟的时间。

12、在20µl的反应体系里，只要有几个拷贝的DNA分子就能被检测出来。

13、BIOGHC Elitefast SYBR kit具有非常强的抗干扰能力，能够对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测，也能不经处理直接对菌落、血液、土壤和粪便中的靶基因进行检测分析。

14、试剂盒以预混液的形式包装，使用极其方便。

15、说明：BIOGHC Elitefast SYBR Master Mix包含dNTP Mix、Mg2+、SYBR Green I、BIOG热启动聚合酶。

16、2、一般来说反应体系中引物终浓度为0.2μM可得到较好的扩增效果。

17、当反应结果不理想时，可以在0.1-1.0μM范围内调整引物浓度。

18、3、qPCR反应灵敏性高，模板量的准确性对结果影响很大，建议将模板适度稀释后加入，或用50ul反应体系。

19、4、模板体积最好不超过反应体积的10%，操作过程中避免强光照射。

20、5、扩增产物长度请选择在100bp-500bp范围内。

21、 6、反应条件：95℃加热6-10分钟，以激活热启动DNA聚合酶，然后95℃ 5-15秒，60℃ 30-35秒，进行40个循环。

22、反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值等适当调整。

本文到此分享完毕，希望对大家有所帮助。

　　免责声明：本文由用户上传，与本网站立场无关。财经信息仅供读者参考，并不构成投资建议。投资者据此操作，风险自担。 如有侵权请联系删除！